二氧化碳培養箱是細胞培養時必須的一個儀器，二氧化碳培養箱為細胞提供一定比例的二氧化碳氣體，細胞提供比較穩定的酸堿環境。在日常使用二氧化碳培養箱時，較常見的注意事項如下：

① 使用細胞培養瓶時，螺旋瓶口的細胞培養瓶不要擰緊，微松保證可以透氣，能夠與培養箱內的氣體進行交換，瓶口不能太松不然容易導致空氣中的細菌落入培養瓶中。
② 保證二氧化碳培養箱中的氣體的無菌，培養箱流入氣體端最好有空氣過濾器，另應該定期進行消毒，若是紫外消毒，不能在有細胞下進行。
③ 保持二氧化碳培養箱中的氣體的濕度，在水槽中加一半的滅菌的蒸餾水，也可以防止細胞培養液之中的二氧化碳揮發。
④ 保持二氧化碳培養箱的溫度在37℃，5%的二氧化碳氣體濃度，相對于電熱型的培養箱，要保持室溫在25度，避免培養箱的溫度感受器失靈。
⑤ 需要定期對二氧化碳培養箱內的二氧化碳濃度探頭進行檢測，用二氧化碳測試儀測試，并且進行零點的調整，防止二氧化碳濃度零點漂移現象。
⑥ 培養箱里邊要放至少應該有一個溫度監控裝置，可以多個，作為二氧化碳培養箱的溫度對照，來檢測培養箱的溫度感受器是否失靈等。

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